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生命中不可失去的十种东西
2008-04-14 19:39:03
1.洒脱
——无论何时都要让自己可以微笑的挥手说再见
2.童心——无论你有多老,你的心不能变老
3.音乐——如果没有音乐,你的人生将会乏味无比
4.浪漫——偶尔浪漫一下,那种感觉就像一只小鸟在空中飞翔吧
5.优雅——你可以粗鲁,但在适当的时候优雅一点总是好的
6.沉思——在你有一肚子火要发之前,先给自己 10分钟沉思一会儿
7.驰骋——如果真的累了,就变成一只蝴蝶逃开一会吧,不要让自己太累
8.纯洁——现在的社会已经够混浊了,纯洁真是不容易做到呢
9.勇敢——做个勇敢的精灵,不惧狂风会撕碎你的翅膀
10.可爱——我相信,你会因为可爱而美丽 
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提来米苏之恋
2008-04-14 19:13:48
女生版
我想我只是这个学校里一个很普通的女孩子。我从来不穿淑女的裙子,性感的靴子。我只穿黑色的衣服和牛仔。 走路的时候也不会左顾右看。低头,直视,是我的一贯的状态。 唯一不同的是我的睫毛是蓝色的。
我欣赏学校里独来独往的女生。每次和这样的女生擦肩而过,我会在心里轻声对自己说:Leona你看,是和你一样坚持的人。 坚持是种疏离的状态。 疏离并不代表孤寂。
于是,我坚持每天都会赶5点15的地铁回家。因为那个时候的人最多。我可以随便地看自己喜欢看的面孔。不需要掩饰。
也习惯在等待的时候站在柱子的后面。因为会害怕当呼啸的地铁开过的时候,会有人从背后把我一把推下去。上车的一刹,又会在幻想我脚尖被卡在了门外面怎么也拔不出来的情景。这种情景。这种无端的幻想,是我每天的继续游戏,并且感到快乐。
最近地铁口新开了家蛋糕店,叫KISS’N BAKE,卖一些小且贵的点心。
我喜欢丫在柜台前仔细观察每块蛋糕的色泽和花纹,看师傅在透明的玻璃后面现场制作。然后到对面的便利店买一瓶百事可乐。去搭地铁。
经常看一种小点心叫TIRAMISU,中文叫提来米苏。是来自于意大利的奶酪,是咖啡的贴心小点心。
我是对咖啡过敏的人,却极爱它的名字。TIRAMISU,读出口就充满了爱情 幻想的香气。偏就只有这个小东西上用巧克力写着花体的LOVE,我为它砰然心动。 星期一 天气大雾 不知道为什么,冬天也会下这么的雾。马上就是圣诞节了,班里给我下了制作板报的任务。
该死,赶到地铁已经6点30了。我还是去看了KISS’N BAKE,照例停留了5分钟。今天师傅没有做新的花式。到对面便利买可乐,下地铁。
找了一个角落的位置站好。今天的时间不对,人不多,好看的人更少。车马上要开的时候,冲进来一个长头发的男孩子,又高又瘦。我很少见男生可以把头发留这样的整洁不邋遢。他穿乔丹的鞋了,FOX的草绿裤子,上面拴HARRY DAIVISON的链子。全都是我喜欢的牌子。重要的是他手里拎着KISS’N BAKE的蛋糕盒子。那种小小的SIZE大概只能装进一块TIRAMISU,我恨不得走过去问清楚。
他拿出手机必短消息,是NOKIA,黑色的8850,我想那块TIRAMISU一定是他送给他心爱的女孩的。现在他一定是在发信息给她。真是甜蜜的人。
他临下车的时候向我这边若有若无的望过一眼,我看清了他的脸,是个帅气的男孩。
星期二 天气依旧是大雾
倒霉的天气,倒霉的我。放学后被拉去做学校的演出彩排。看了一堆面目全非的人,我力气全无。
赶到地铁看看手表,6点30 分,和昨天一样的时间。先跑去KISS’N BANK吸收能量5分钟,买水,搭地铁。
车要开的时候,竟然又是他跑上来。手里提的还是KISS’N BANK的蛋糕盒子。
他依旧站在昨天的位置,而我也一样。他继续拿出手机发短消息。
我把自己裹在厚厚的毛围巾里。
今天我不知道他下车的时候是怎么样的情形,因为我开始生自己。我对这个男生无端的幻想开始膨胀。
我变得小气,不能容忍见到他把喜欢的TIRAMISU送给别人的样子。
星期三 雾
今天没有被缠住,可我还是磨蹭到6点30分才到了地铁口。
来得常了,连售货小姐都认得我。她热情地和我打招呼,不再问我要什么的问题。喜欢这家店也是因为喜欢这种并不询问状态。我最怕去百货公司听到最多的就是:“您需要什么?”的问题。
我冲她微笑,发现柜台里多了一种点心,是个微型的水果蛋糕。而我的TIRAMISU正好好地躺在第2个位置上。
忽然一个男声说:“请给我一个TIRAMISU。极具磁性。
TIRAMISU这个词,我每天都会自己念给自己听无数次。今天是第一次从别人嘴里听见这个我深爱的单词。
我转过头去看他,竟然是他。我终于证实了自己的想法,果然,他买的是TIRAMISU,我用了“竟然”两个字之后,想了想又觉得有错误。
我难道不是故意拖迟到6点30分,难道不就为了能够再见到他吗?
他向我笑了笑,我迅速低下头,装作并没看见。
不过是可以擦肩的陌生人,我安稳住自己。然后,买水,又和他搭了同一班地铁。
这次,他站在我身边,只有0.01米的距离,我几乎能清楚地闻到他身上CK BE的香水 的味道。
心跳过速,怀疑我的耳朵一定被烧得通红。我觉得自己马上要死在这片寂静里的时候,我听见他清晰地说:“我用J’adord?”
这个厉害的男人连我用的香水都闻的出来。
我这次抬头看了看他的眼睛,是深深的黑色。我镇静地说:“你用的CK BE”。说完便转过头去不看他。
没有继续对话。彼此都有遇到对手的感觉。
要下车的时候,他递我一张纸条,我伸出手接过来。小小的蓝色便筏,被我紧紧地攥在手心里,都是汗水。
他走后我打开来看,是一个手机的号码。我想会属于黑色的8850。
星期四 晴
终于放晴的天气一时让我无法适应。
太久不见的太阳下,我怀疑起这几天经历的真实性。
最不幸的是——我弄丢了那张纸条。
大概就是这样吧,太过重视的东西就往往无法得到。
我依然6点30分去KISS’S BANK,5分钟后搭乘地铁。
没有他。
真的是我做一场梦吧。
其实也很好,他是有女朋友的人。而且感情也一定很好,不然他不会买TIRAMISU给她。
虽然我一直不愿意承认:我是因为这小小的,被他拎在手中的TIRAMISU而喜欢上他的。
他们是只见过三次的陌生人,尽管彼此一下就能认出彼此香水的牌子。
一个手机的号码不能代表什么,尽管是我喜欢的黑色NOKIA8850。
星期五星期六星期日 晴
我每天都6点30分跑去地铁,却没再见过他。
这个世界太大了,我们曾经的缘分已经耗尽,现在连唯一的线索都被遗失了。
星期一 晴
我去穿了耳洞。左面2 个,右面1个,一共是3个。为了纪念我3天就消失的爱情。
很疼。我为了安慰自己,打车回家。
星期二 晴
我生病了,这个城市现在流行疼痛叫感冒。我躺在家里一直地睡。男生版
我是这个城市里的SOHO一族,单身,专门在家里用计算机帮人作室内效果图。不是经常出门。
只要出门。我就喜欢搭乘地铁。
星期一 雾
今天交图的公司离地铁很近。我还注意到了有一家新开的蛋糕店,里面有志我喜欢的TIRAMISU,一会儿可以买回去配了咖啡一起吃。
冲进地铁的时候,我看见角落里的一个女孩子。黑色的外套,又长又直的头发。双手上有洗不掉的油墨,还戴了很多的手链。我看她的时候,她一直在盯着我的TIRAMISU猛看。眼睫毛是蓝色的。
本来还想多看她几眼,却被公司里朋友发来的短信息打断。他说今天的图纸完全没有问题。明天就把钱汇到我的帐户里。我又回给他一些客气话。
要下的时候,我忍不住又看了她一眼。她应该还是学生,眉目里却有深圳特区的坚持。她不是那种特别漂亮的女孩。却可以让人放心去认真疼爱。
她若有若无地看向我,我听见自己心砰然心动的声音。
星期二 雾
我很早就来了,先买了一个TIRAMISU,拎在手里,找了个不明显的角落等她来。
6点30分她来承蛋糕店晨转了5分钟。然后去对面的便利店里买可乐,搭地铁。
我跟她进了同一个车门。
我看见她眼睛微微好奇地睁大。
我转过身,背对她。玻璃窗上她身影,都让我如此着迷。
我拿出手机发短信息给朋友,让他们请我吃饭。因为我找到了喜欢的人。
发过消息后,我仔细地看她。她仿佛在和谁生气,死劲地盯着自己的鞋子,始终没抬起头。
那好吧,如果明天她还是准时出现的话,我就要留给她我的手机号码。
星期三 雾
6点30分,我准时去了那个叫做KISS’N BAKE的蛋糕店。
果然,她在。
她在仔细地看新出的水果蛋糕,并没有注意到我的出现。于是,我和领带货小姐说:“请给我一个TIRAMISU“,她猛地转头看我,我冲她微笑。她却害羞地低下头走了出去。真是可爱的女孩!
我们依旧搭同一班地铁。
这次,我站在她的旁边,仅仅0.01米的距离。我闻到她身上的J’adore的香味。我忍不住问她的时候,车上非常的安静。我听见心脏跳动得厉害。
她没有正面回答,去说:“你用的是CK BE”,真是厉害的对手,她竟然能闻出来我用的香水。
下车的时候,我把我的的手机号码写在纸上给她。她伸出手来接的时候,我看见她白皙的双手和红红的耳朵。
我想,她也应该很喜欢我。
星期四 晴
适合情人一起出去玩的天气,她没有电话给我。而也因为赶一个设计而无法赴6点30的约会。
我想,我是应该给这个女孩考虑的时间。
我是安心地等待。
星期五 晴
一个电话都没有,我不知道到底是怎么回事。
我在工作的时候扭了手机无数次,它好好的,并没有坏掉。
星期六星期日 大概是晴
我熬了2个通宵,然后睡了2天。
并不知道这个世界发生了什么。但是有一点我能够肯定。
她没有给我打过电话。
星期一 晴
我6点30去买了个TIRAMISU,然后去搭地铁。没有看见她。心情 沮丧。她难道一点都没有喜欢过我?所以不理这个号码吗?
星期二 晴(也是大概)
因为我病了,感冒!
懒得再写字。TIRAMISU版 男生和女生的病都好了。
女生以前总觉得美好的东西是碰不得的。可这次她终于决定要去吃一次TIRAMISU,作为对她没有结尾的爱情的悼念。
男生也决定最后再去那个地方买一次TIRAMISU,如果这次再没有遇到她也就真的算了。
6点30分,准时。
她微笑着对售货小姐说:“请给我一个TIRAMISU。”
忽然听见很熟悉的一个男声说:“我也要一个。” -
HAPPY BIRTHDAY
2007-10-27 00:11:05
本命年快乐 24岁快乐
祝自己健康
祝自己找到生命中的另一半
祝自己永远有一颗平常心
仰望天空 志存高远
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传说中的考试周
2007-10-26 20:45:30
好久没有考试了,真有点不适应,
不过传说是很轻松的,考完了就可以玩了,就可以上网了,就可以过乱糟糟的生活了
仔细想想这两个月其实也没真的学到什么,只是在适应环境,改变自己
似乎改造的差不多了,应该学着无畏无悔的生活
忙忙碌碌 何时是个头 或是永远没有头
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肾移植病理学研究进展
2007-10-15 00:39:07
肾移植病理学研究进展
1、 移植肾缺血再灌注损伤:
移植肾缺血再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury, I/R injury)是术后移植肾原发性无功能(primary non-function,PNF)或功能延迟(delayed graft function,DGF)的最主要原因。Florack等14报道10分钟内的热缺血虽然可较快的恢复,但30分钟的热缺血损伤则需要1周甚更长的时间才能恢复,Wijnen 15及Shoskes等16亦同样观察到类似结果。Troppmenn等17报道虽然肾脏可以较好的耐受24-72小时的冷缺血,但仍有23%的可能性会发生移植物功能延迟。I/R损伤的直接结果是造成移植肾急性肾小管坏死(acute tubular necrosis, ATN)。新近的研究发现缺血与再灌注中的细胞凋亡(apoptosis)和炎症因子及氧自由基的产生在移植肾的损伤机制中占有重要地位,并且I/R损伤与排斥反应也具有密切的关系。
2、供肾活检:
供肾活检在一些主要的尤其是国外的肾移植中心较受重视,其目的主要是对供肾质量予以评估,排除是否存在供肾预存性病变(preexisting disease)并为移植后的活检提供肾脏组织形态学参照。随着供肾的日益短缺,在现有条件下,为扩大供肾来源,选用一些可能存在预存病变的边缘性供肾(marginal donor)也成为一种不得已的选择,这些边缘性供肾的不利因素包括供体年龄大于55岁、供体高血压、糖尿病、弥漫性血管内凝血(disseminated intravascular coagualtion, DIC)、长的冷缺血时间或无心跳的尸体供肾(non-heart-beating donor)等。虽然临床资料和供肾的肌酐等生化检查可帮助了解供肾状况,但并不足以作为选择供肾的标准,因为虽然年龄可反映肾脏退行性变化的情况,如55岁时肾脏内硬化性肾小球的比例为0.2-16.7%, 而75岁者其硬化性肾小球的比例达到10.5-23.0%,但单纯并绝对的以年龄界限作为供肾取舍的依据并不合适,如动脉的玻璃样变也有报道见于25-40岁的人群并成为早期动脉硬化的信号,而且人体肾脏内年龄因素相关的病变差异非常大,除活检外的其它检查很难予以明确,此外活检还可以发现以前未曾发现的供肾病变,因此Pittsburgh大学移植中心的 Randhawa等18认为供肾的活检才是了解其结构并帮助临床决定取舍的关键手段,在Pittsburgh中心边缘性供肾的年龄界限为55岁,超过55岁者均予以供肾活检以确定是否具有老年性动脉硬化及其程度,同时供肾相关的病变包括毛细血管微血栓、细小动脉硬化、肾小球硬化和间质纤维化等均可观察并作为以后活检的参考。关于供肾活检的取材,Randhawa认为单纯的针穿活检不足以提供充分的组织以满足诊断,而应采用皮质的楔形活检,也有报道19 认为活检组织内应包含25个肾小球方可确立诊断。由于供肾活检是帮助临床确定肾脏取舍而并不应因诊断而延长供肾冷缺血的时间,其诊断应快速并应可以在2小时内完成,但冰冻切片并不适合于该活检。虽然供肾活检尚无公认的诊断标准,但基于Lehtonen及Gasber等的研究,建议如供肾活检内有大于20%的肾小球有硬化则该肾应不宜选用。令人费解的是lehtonen等发现供肾活检中的慢性病变并不完全与移植后近期的功能相关,我们的191例移植肾活检中的50例移植术前活检亦发现少数供肾中存在小动脉硬化、慢性间质性肾炎等,但移植术后近期肾功能未见异常。有的研究中显示供肾活检中的急性肾小管上皮细胞坏死20 21或凋亡22可预示术后移植物功能延迟。而供肾活检中如可见严重的肾小球内毛细血管内血栓则该肾应放弃。关于供肾的IgA肾病,最近的文献认为轻度的IgA肾病病变在移植后不会对移植肾功能产生不良影响并在移植术后缓解23,类似的情况还见于供肾感染后肾小球肾炎24,Ⅰ型膜增生性肾小球肾炎和狼疮性肾炎25,而供肾的局灶性硬化性肾小球肾炎则在移植后不会进一步进展26。而关于供肾的良性肿瘤病变,如果是平滑肌瘤(leiomyoma)或血管肌脂肪瘤(angiomyolipoma)则并不影响该供肾的移植。对于恶性肿瘤如肾细胞癌,确定癌肿的直径大小非常重要,对于直径小于0.5cm并已完全切除者,移植后肿瘤复发的可能性是非常小的,但对此仍存在争议。
3、亚临床型排斥反应:
由于术后6个月内有近1/3的功能稳定的移植肾的活检中可见亚临床型急排斥(subclinical acute rejection),由此亚临床型排斥反应越来越引起临床的重视。Grimm等27对临床明显的急性排斥与亚临床型排斥两种排斥类型中的浸润细胞表型进行对比研究,通过免疫组织化学和图像分析技术发现,两种类型排斥具有相同的Banff评分,但CD8+和CD68+细胞在临床排斥中略多于亚临床急性排斥,而淋巴细胞活性产物包括Cd25、穿孔素(perforin)、TNF-α在两者间没有明显差别,而仅活化的巨噬细胞在两者间有明显差异,表明巨噬细胞在临床排斥时的肾功能损伤中具有关键作用。
虽然有如FK506(tacrolimus)、骁悉(Myciphenolate Mofetil, MMF)及雷帕霉素(rapamysin)等新的免疫抑制剂开始在临床肾移植中应用,但术后最初1周内经肾活检证实的急性排斥反应发生率仍维持在9-12%左右28 29,而急性排斥中一个重要的免疫病理学机制即肾小管上皮细胞和血管内皮细胞粘附分子的表达增加,Koo等30最早注意到供肾的状况及由此导致的肾组织内细胞粘附分子的表达情况对术后急性排斥反应的影响,其研究证明了供肾的细胞粘附分子水平与移植后急性排斥反应的发生率有相关性,其结果中显示尸体供肾由于血液动力学改变、缺血和非特异性炎症等因素,使得其细胞粘附分子的表达较之亲属供肾明显增高。此后Schwarz等31通过对20例亲属肾移植及53例尸体肾移植的供肾所作的活检,并应用免疫组织化学方法对活检肾组织中细胞间粘附分子(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)、血管内皮细胞粘附分子(vascular adhesion molecule-1,VCAM-1)及E选择素(E-selectin)的表达水平予以分析,以试图明确供肾活检组织中的细胞粘附分子是否可预示术后急性排斥反应,结果显示移植供肾活检组织中ICAM-1、VCAM-1及E-Selectin并不能预示是否发生急性排斥,但ICAM-1的高表达可预示可能发生因缺血导致的肾损伤。
4、移植肾急性体液性排斥反应:
肾移植术后急性体液性排斥反应(acute humoral rejection, AHR)常见于术后1周至数周内,通常先有术后移植肾功能正常,而后发生AHR,往往预示有不良的预后32。其活检组织学表现有小动脉和细小动脉管壁的纤维素样坏死(fibrinoid necrosis)、肾小球毛细血管丛的纤维素样坏死、肾小管周毛细血管内中性白细胞淤积、肾实质缺血性坏死或梗死。以前的报道认为其活检证实的严重血管病变的发生率在环孢素A应用以前为7%,在环孢素时代为1-3%,最近Crespo等32经大例数的临床活检组织学研究分析,认为其在临床肾移植中的总体的发生率大约为7.7%。绝大多数AHR发生时伴有抗供体特异性抗体(donor specific antibody, DSA),几乎所有DSA阳性的AHR移植肾的活检组织,经免疫荧光检查均发现在肾小管周毛细血管内皮有弥漫性的C4d沉积。这一研究确定了DSA的检测及活检组织中的c4d检查为早期诊断AHR提供了一个的有效途径。同时这一研究也提示移植后的肾脏原发性无功能/功能延迟,部分原因可能是由于移植术前受者体内难以检测的低水平的DSA,而在移植术后几天内其抗体水平不断升高直至产生AHR。以前的研究者证实AHR中抗HLAⅠ类抗原的DSA起主导作用,而本研究证实AHR中抗HLAⅡ类抗原的DSA也发挥作用。此外这项研究显示10例中有9例AHR采用连续5天的血浆清除及合并FK506与骁悉的联合应用成功予以逆转。
5、急性排斥反应的小管上皮炎:
早先的认识认为移植肾活检或因失功切除的肾组织内,间质内的淋巴细胞浸润即证明有急性排斥反应存在,但目前已认识到单纯的间质内以淋巴细胞为主的单个核细胞浸润并不能作为诊断急性排斥的依据,而移植肾动脉内膜炎(arteritis)和肾小管被淋巴细胞等单个核细胞侵入而形成的明显的小管上皮炎(tubulitis)才是诊断急性排斥反应的组织学依据,这已被广泛认同并成为移植肾活检国际诊断标准中的一项主要依据33 34, 但小管上皮炎形成的细胞学机制及其小管上皮细胞与侵入细胞之间的相互作用仍不完全明了,而且急性排斥时的小管炎,由于侵入的炎症细胞在多种因子的作用下可在小管上皮层内持续浸润,逐渐形成慢性排斥的病理结构变化,使损伤进入不可逆阶段,因此小管上皮炎的研究成为目前急性排斥中细胞免疫机制研究的重点。在急排形成的小管上皮炎时,肾间质内浸润的单个核细胞突破肾小管基膜进入小管上皮层,停留在上皮细胞与基膜之间或上皮细胞之间。目前已明确浸润的单个核细胞主要为活化的CD8+T淋巴细胞35 36。最新的一系列研究发现小管上皮细胞不仅是细胞免疫损伤的靶细胞,而且其本身亦是启动与调节这种细胞免疫损伤的中心环节37,其具有异常复杂的免疫与细胞分子生物学机制,虽然Harrison等38和Isobe等39在实验动物心脏移植模型中成功地阻断了LFA-1(lymphocyte function-associated antigen)与ICAM-1间地协同作用而避免了排斥反应,但在临床肾移植中却难以成功40的结果提示,移植肾的损伤实际上从缺血再灌注时即已开始,而关键的损伤即肾小管上皮细胞的损伤41。Ysebaert等42证实再灌注时的损伤可以引发炎症反应,刺激血管内皮或小管上皮释放多种趋化因子(chemokine)和细胞因子(cytokine),上调和产生血管内皮和小管上皮细胞上的MHCⅡ类抗原表达及VCAM-1、ICAM-1等粘附分子,吸引淋巴细胞浸润,产生免疫损伤。
Rossi等43认为实质细胞可产生细胞因子并可上调多种细胞因子受体以吸引特异性白细胞向炎症反应局部的迁移与定位。Baer 等44发现在人体肾小管上皮细胞上有细胞因子尤其是RANTES的表达,随后 Robertson等45通过对人体移植肾急排时活检组织的间接免疫荧光和激光扫描共聚焦显微镜技术(scaning laser confocal microscopy, SLCM)证实小管炎时有RANTES,MCP-1,MIP-1α,MIP-1β的表达,并观察到这些趋化因子在严重的小管炎时在小管上皮细胞及其外周的毛细血管均有强烈表达,同时浸润入小管上皮的炎症细胞也有上述4种趋化因子的高水平表达,这一研究进一步证实小管上皮细胞自身即是某些趋化因子的主要来源,而且该研究还发现,小管上皮细胞产生的多种趋化因子与移植术后的时间和以往的急性排斥的次数无关,而与排斥的严重程度相关,并且在急排的各个级别中均有RANTES的高表达,提示RANTES在肾小管炎中具有关键作用。Nadeau等46研究证实RANTES也在急性排斥向慢性排斥的转变中发挥作用。Murphy等47发现游走到炎症局部的淋巴细胞等炎症反应细胞可通过进一步产生趋化因子强化局部的炎症损伤。Dustin 等48发现穿过肾小管基膜的淋巴细胞可在高浓度的MHC分子的作用下停留在小管上皮层内,MHC分子充当了“stop signal”的作用。Roberston等49 50相继发现淋巴细胞可在肾小管上皮内充分停留发挥活性作用,并且可予以增生。在肾小管上皮细胞上表达有钙粘连素(cadherin),它的主要作用为建立小管上皮细胞之间的紧密连接并参与细胞内骨架的形成。最近的研究发现51 cadherin与整合素(integrin)αEβ7具有组织嗜异性的相互结合作用。Cepek等52通过对正常以及炎症时的粘膜上皮层中浸润的淋巴细胞的研究证明,95%以上的CD8+T淋巴细胞均表达有αEβ7,而外周血T淋巴细胞内αEβ7表型阳性的仅占2%。αEβ7的作用为促进淋巴细胞与上皮的粘附,而最新的研究53发现αEβ7还具有促进浸润于粘膜上皮内的淋巴细胞增生及发挥细胞免疫功能的作用。随着肾小管上皮炎的研究,上皮淋巴细胞CD103的作用逐渐引起重视,Hadley等最先注意到在CTL CD8+淋巴细胞中有部分表型为CD103 54,并进一步证明在肾组织内浸润的淋巴细胞中有约16%的细胞为CD103,Roberston等55对正常肾组织及移植后的肾组织的比较研究发现,正常肾组织内没有浸润于小管内的淋巴细胞和CD103+细胞,在急性排斥时,间质内及小管内的CD8+细胞数量明显增多,且可见CD103+细胞并且仅局限于肾小管上皮层内,小管上皮层内的CD103+ 与CD8+细胞的比例的增加表明排斥严重程度的增加,而且肾小管上皮层内的CD103+在急性排斥缓解后仍持续存在,提示在急性排斥进展为慢性排斥的过程中也有一定作用。
慢性排斥反应形成后,由于其组织病理学变化已不具有特异性,难以判断其确切原因,Minervini等56研究的结论认为急性排斥时的肾小管上皮炎对移植肾的预后有非常不利的影响,这似乎又为慢性移植肾失功的免疫学基机制增加了一个新的砝码。
6、慢性排斥反应:
慢性排斥反应或慢性移植肾肾病(chronic allograft nephropathy, CAN)是导致移植肾丧失功能的主要原因之一,并成为限制移植肾及受者长期存活的主要因素,而移植肾肾小球病(transplant glomerulopathy,TG)又是其中的主要病变。目前研究发现在移植肾活检组织中,肾小管周毛细血管基膜(peritubular capillary basement membrances, PTCR)的增厚与移植肾肾小球病有明显的相关性。PTCR增厚最早也是在移植肾中被观察到57 58 59,并且它被认为是在组织学上早期诊断移植肾肾小球病的一个主要线索。PTCR增厚的定义为在电镜下,肾小管旁毛细血管基膜增厚,并依据增厚的层数分为轻、中及重度三个级别,轻度为毛细血管基膜增厚为2-3层,中度为4-6层,4-6层以上为重度。。稍早仅有Drachenberg等60最先对PTCR在移植肾及非移植肾中的表现进行了较系统的研究,其通过50例移植肾与85例非移植肾的比较发现,25例移植肾(50%)具有移植肾肾小球病,并且全部有 PTCR 增厚的表现,而没有出现移植肾肾小球病的25例中仅有3例出现PTCR增厚,而非移植肾中仅有极个别出现PTCR 增厚现象。最近Gough等 61对移植肾慢性排斥中的肾小球病中的PTCR增厚进行了进一步的研究,其对278例肾活检(其中移植肾135例,非移植肾143例)研究发现,移植肾中的15例移植肾肾小球病中有14例 具有PTCR增厚表现,并且其严重程度的分级与移植肾肾小球病的严重程度相吻合,而在120例无移植性肾小球病的移植肾中仅有7例出现 PTCR增厚,在143例非移植肾中仅有13例表现有 PTCR增厚,分别见于恶性高血压肾病、肾的微血管血栓、狼疮性肾炎、新月体性肾炎及可卡因滥用所致的肾功能衰竭等。由此可见PTCR增厚可作为诊断慢性排斥/慢性移植肾肾病的可靠依据,尤其在活检组织中没有肾小球时,PTCR增厚可作为移植肾肾小球病的一个间接证据。关于PTCR增厚的机理目前认为应以免疫因素为主,毛细血管同样可成为免疫因素攻击的靶目标62。Takeuchi 63和Mauiyyedi等64在最近的文献中也支持这一免疫损伤机制,此外毛细血管以自分泌方式产生内皮素(endothelin)-1也具有重要作用。
7、保护基因:
Bach等已认识到移植物的命运不仅取决于受体对其的免疫攻击强度 而且也取决于移植物自身的自我保护效应65。来自Avihingsanon等66报道的最新的研究发现显示,在怀疑为急性排斥的移植肾活检组织内有“保护基因(protect gene)”A20、HO-1(血红素加氧酶-1)和 Bcl-xL表达,这一报道是这一领域目前唯一的系统的研究。Bcl-xL为细胞凋亡抑制基因中的一种,稳定地表达于无排斥的移植肾及静息状态的血管内皮;A20最早由Opipari等67在脐静脉血管内皮细胞上发现,它参与调节血管内皮细胞对损伤的反应,对TNF及Fas诱导的细胞凋亡具有拮抗作用,同时可抑制血管平滑肌细胞的增生,Arvelo等68还报道A20可阻止移植物动脉血管病的发生;HO-1是一种应激反应基因,其产物可催化分解血红素为胆绿素、铁离子及一氧化碳(CO),HO-1的生物分解副产物具有重要的抗氧化、抗炎症、抗细胞凋亡及稳定细胞的作用。Avihingsanon根据对31例功能稳定的、急性排斥及慢性排斥的移植肾活检组织内这三种“保护基因”表达水平的变化及表达部位的研究发现,在急排时A20及 HO-1表达水平明显升高,其表达的部位不仅位于浸润的单个核细胞,而且也位于血管内皮细胞(EC)、平滑肌细胞(SMC)、肾小管上皮细胞及肾小球,而在急性排斥时,A20、HO-1的表达下降,此时A20位于EC细胞和SMC细胞,HO-1主要位于肾小球。与A20及HO-1不同,Bcl-xL主要表达于静止状态的EC细胞,因此在无排斥肾组织内有Bcl-xL稳定地表达,而在慢性排斥时A20及 HO-1及 Bcl-xL三者的表达均明显下调,从而失去了对血管内皮的保护作用。重要的是研究还发现,A20及 HO-1仅能在急性排斥时才能检测到,而在急性肾小管坏死(ATN)所导致的移植肾原发性无功能(PNF)和环孢素毒性损伤(CsA-NT)时无法检测到,由此A20及 HO-1成为临床诊断急性排斥反应的一个新标志物,并为临床上急排与肾小管坏死及环孢素毒性损伤间的鉴别提供了一个有效的途径。 -
质粒抽提原理
2007-10-14 23:56:01
碱裂解法从大肠杆菌制备质粒,是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。可以我收研究生十几年了,几乎毫无例外的是我那些给人感觉什么都知道的优秀学生却对碱法质粒抽提的原理知之甚少。追其原因,我想大概是因为《分子克隆》里面只讲实验操作步骤,而没有对原理进行详细的论述。这是导致我的学生误入歧途的主要原因。后来我发现其实是整个中国的相关领域的研究生水平都差不多,甚至有很多“老师”也是这个状态。这就不得不让人感到悲哀了。
我想这恐怕和我们的文化有点关系。中国人崇尚读书,“学而优则仕”的观念深入人心。经常听到的是父母对他们的独苗说,你只要专心读好书就可以了。所以这读书的定义就是将教课书上的东西记住,考试的时候能拿高分……这就是现代科学没有在中国萌发的根本原因。如果中国文化在这一点上不发生变化,那么科学是不能在中国真正扎根的,它只能蜕化成新的“八股学”。
生命科学是实验科学,它讲究动手。如果实验科学只要看看书就可以了,那我想问有那位神仙看看书就会骑自行车了?或者听听体育老师的讲解就会滑冰了?
可是光动手不思考,不就成了一个工匠?一个合格的生命科学研究者,需要在这两方面完善自己。一个杰出的科学工作者,是一个熟知科学原理并善于应用的“艺术家”。
每个曾经用碱法抽提过质粒的同学,希望你看本文后能有所思考,让中国的未来有希望。
为了方便理解,这里罗列一下碱法质粒抽提用到三种溶液:溶液I,50 mM葡萄糖/ 25 mM Tris-Cl / 10 mM EDTA,pH 8.0;溶液II,0.2 N NaOH / 1% SDS;溶液III,3 M醋酸钾/ 2 M醋酸。
让我们先来看看溶液I的作用。任何生物化学反应,首先要控制好溶液的p H,因此用适当浓度的和适当pH值的Tris-Cl溶液,是再自然不过的了。那么50 mM葡萄糖是干什么的呢?说起来不可思议,加了葡萄糖后最大的好处只是悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管子的底部。因此,如果溶液I中缺了葡萄糖其实对质粒的抽提本身而言,几乎没有任何影响。所以说溶液I中葡萄糖是可缺的。那么EDTA呢?大家知道EDTA是Ca2+和Mg2+等二价金属离子的螯合剂,配在分子生物学试剂中的主要作用是:抑制DNase的活性,和抑制微生物生长。在溶液I中加入高达10 mM的EDTA,无非就是要把大肠杆菌细胞中的所有二价金属离子都螯合掉。如果不加EDTA,其实也没什么大不了的,只要不磨洋工,只要是在不太长的时间里完成质粒抽提,就不用怕DNA会迅速被降解,因为最终溶解质粒的TE缓冲液中有EDTA.如果哪天你手上正好缺了溶液I,可不可以抽提质粒呢?实话告诉你,只要用等体积的水,或LB培养基来悬浮菌体就可以了。有一点不能忘的是,菌体一定要悬浮均匀,不能有结块。
轮到溶液II了。这是用新鲜的0.4 N的NaOH和2%的SDS等体积混合后使用的。要新从浓NaOH稀释制备0.4N的NaOH,无非是为了保证NaOH没有吸收空气中的CO2而减弱了碱性。很多人不知道其实破细胞的主要是碱,而不是SDS,所以才叫碱法抽提。事实上NaOH是最佳的溶解细胞的试剂,不管是大肠杆菌还是哺乳动物细胞,碰到了碱都会几乎在瞬间就溶解,这是由于细胞膜发生了从bilayer(双层膜)结构向micelle(微囊)结构的相变化所导致。用了不新鲜的0.4 N NaOH,即便是有SDS也无法有效溶解大肠杆菌(不妨可以自己试一下),自然就难高效率抽提得到质粒。如果只用SDS当然也能抽提得到少量质粒,因为SDS也是碱性的,只是弱了点而已。很多人对NaOH的作用误以为是为了让基因组DNA变性,以便沉淀,这是由于没有正确理解一些书上的有关DNA变性复性的描述所导致。有人不禁要问,既然是NaOH溶解的细胞,那为什么要加SDS呢?那是为下一步操作做的铺垫。这一步要记住两点:第一,时间不能过长,千万不要这时候去接电话,因为在这样的碱性条件下基因组DNA片断会慢慢断裂;第二,必须温柔混合(象对待女孩子一样),不然基因组DNA也会断裂。基因组DNA的断裂会带来麻烦,后面我再详细说明。
每个人都知道,溶液III加入后就会有大量的沉淀,但大部分人却不明白这沉淀的本质。
最容易产生的误解是,当SDS碰到酸性后发生的沉淀。如果你这样怀疑,往1%的SDS溶液中加如2M的醋酸溶液看看就知道不是这么回事了。大量沉淀的出现,显然与SDS的加入有关系。如果在溶液II中不加SDS会怎样呢,也会有少量的沉淀,但量上要少得多,显然是盐析和酸变性沉淀出来的蛋白质。既然SDS不是遇酸发生的沉淀,那会不会是遇盐发生的沉淀呢?在1%的SDS溶液中慢慢加入5 N的NaCl,你会发现SDS在高盐浓度下是会产生沉淀的。因此高浓度的盐导致了SDS的沉淀。但如果你加入的不是NaCl而是KCl,你会发现沉淀的量要多的多。这其实是十二烷基硫酸钠(sodium dodecylsulfate)遇到钾离子后变成了十二烷基硫酸钾(potassium dodecylsulfate,PDS),而PDS是水不溶的,因此发生了沉淀。如此看来,溶液III加入后的沉淀实际上是钾离子置换了SDS中的纳离子形成了不溶性的PDS,而高浓度的盐,使得沉淀更完全。大家知道SDS专门喜欢和蛋白质结合,平均两个氨基酸上结合一个SDS分子,钾钠离子置换所产生的大量沉淀自然就将绝大部分蛋白质沉淀了,让人高兴的是大肠杆菌的基因组DNA也一起被共沉淀了。这个过程不难想象,因为基因组DNA太长了,长长的DNA自然容易被PDS给共沉淀了,尽管SDS并不与DNA分子结合。那么2 M的醋酸又是为什么而加的呢?是为了中和NaOH,因为长时间的碱性条件会打断DNA,所以要中和之。基因组DNA一旦发生断裂,只要是50-100 kb大小的片断,就没有办法再被PDS共沉淀了。所以碱处理的时间要短,而且不得激烈振荡,不然最后得到的质粒上总会有大量的基因组DNA混入,琼脂糖电泳可以观察到一条浓浓的总DNA条带。很多人误认为是溶液III加入后基因组DNA无法快速复性就被沉淀了,这是天大的误会,因为变性的也好复性的也好,DNA分子在中性溶液中都是溶解的。NaOH本来是为了溶解细胞而用的,DNA分子的变性其实是个副产物,与它是不是沉淀下来其实没有关系。溶液III加入并混合均匀后在冰上放置,目的是为了PDS沉淀更充分一点。
不要以为PDS沉淀的形成就能将所有的蛋白质沉淀了,其实还有很多蛋白质不能被沉淀,因此要用酚/氯仿/异戊醇进行抽提,然后进行酒精沉淀才能得到质量稳定的质粒DNA,不然时间一长就会因为混入的DNase而发生降解。这里用25/24/1的酚/氯仿/异戊醇是有很多道理的,这里做个全面的介绍。酚(Phenol)对蛋白质的变性作用远大于氯仿,按道理应该用酚来最大程度将蛋白质抽提掉,但是水饱和酚的比重略比水重,碰到高浓度的盐溶液(比如4M的异硫氰酸胍),离心后酚相会跑到上层,不利于含质粒的水相的回收;但加入氯仿后可以增加比重,使得酚/氯仿始终在下层,方便水相的回收;还有一点,酚与水有很大的互溶性,如果单独用酚抽提后会有大量的酚溶解到水相中,而酚会抑制很多酶反应(比如限制性酶切反应),应此如果单独用酚抽提后一定要用氯仿抽提一次将水相中的酚去除,而用酚/氯仿的混合液进行抽提,跑到水相中的酚则少得多,微量的酚在乙醇沉淀时就会被除干净而不必担心酶切等反应不能正常进行。至于异戊醇的添加,其作用主要是为了让离心后上下层的界面更加清晰,也方便了水相的回收。
回收后的水相含有足够多的盐,因此只要加入2倍体积的乙醇,在室温放置几分钟后离心就可以将质粒DNA沉淀出来。这时候如果放到-20℃,时间一长反而会导致大量盐的沉淀,这点不同于普通的DNA酒精沉淀回收,所以不要过分小心了。高浓度的盐会水合大量的水分子,因此DNA分子之间就容易形成氢键而发生沉淀。如果感觉发生了盐的沉淀,就用70%的乙醇多洗几次,每次在室温放置一个小时以上,并用tip将沉淀打碎,就能得到好的样品。得到的质粒样品一般用含RNase(50 ug/ml)的TE缓冲液进行溶解,不然大量未降解的RNA会干扰电泳结果的。琼脂糖电泳进行鉴定质粒DNA时,多数情况下你能看到三条带,但千万不要认为你看到的是超螺旋、线性和开环这三条带。碱法抽提得到质粒样品中不含线性DNA,不信的话你用EcoRI来线性化质粒后再进行琼脂糖电泳,就会看到线性质粒DNA的位置与这三条带的位置不一样。其实这三条带以电泳速度的快慢而排序,分别是超螺旋、开环和复制中间体(即没有复制完全的两个质粒连在了一起)。如果你不小心在溶液II加入后过度振荡,会有第四条带,这条带泳动得较慢,远离这三条带,是20-100kb的大肠杆菌基因组DNA的片断。
非常偶然的是,有时候抽提到的质粒会有7-10条带,这是由于特殊的DNA序列导致了不同程度的超螺旋(超螺旋的圈数不同)所致。这里暂不深究。
想说的,终于说完了。谢谢你的耐心。留下一个思考题,为什么真核生物的基因组DNA不能用碱法抽提? -
开学
2007-09-09 13:36:38
又回到了学生时代,读书吃饭,自修睡觉,害怕毕不了业,害怕找不到工作
晚上的硬板床磕得浑身酸痛,早上起来,却不得不面对新的挑战
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飞机传
2007-08-15 01:54:14
第一次坐飞机的时候觉得很惊心动魄。
坐车过江后就能看见很大一个路牌,上书“萧山机场”四个大字,于是振作精神,满怀期待,以为过不了多久就到了,结果七转八拐,开了好久才到,把一整个期待的光环打得七零八落。
机场坐落在一个人烟稀少的地方,从一号门进去是大厅,人群穿梭往来。机票比火车票华丽许多,后面空白处还可以作广告。帅哥美女给我们安检,狠狠地看了几眼,大饱眼福。候机厅里有很多商店,琳琅满目的立成一排,好似参加检阅的军队,打扮得格外整齐光鲜,估计是此地走国际化道路,第一印象很重要。
激动的看着手表,再看看窗外硕大的飞机,想象登机时的伟大场景,冷不丁发现我们的飞机要晚点半个多小时,颇有怨言。就读新加坡的小妞安慰我,说飞机晚点是常有的事,半小时已经很优惠了。可怜还没吃晚饭,饥肠辘辘的踱到一家超市的门口,瞄一眼方便面的小标签,顿时泪奔,还没见过这么昂贵的泡面。三个穷孩子只好百无聊赖的拖着空皮囊静坐,一个钻研《数学的源与理》,一个苦读《Inorganic Chemistry 》(英文原版),砖头般厚,让我佩服得五体投地。
忽听一阵喧闹,貌似飞机到了,一拨人汇成一小队,大包小包,有种逃难的错觉。我以为风光的登机在嘈杂声中烟消云散,还记得自己坐的是17A,靠窗,激动了老半天才发现外面天太黑,而且我的位子望出去是机翼,下面的风景理论上应该看不到。
上了飞机空姐是不能不看的,果然名不虚传,挺拔靓丽,即使是颇有年纪的组长依然气质优雅,终于明白为什么乘务人员需要这么高的个头,撇去审美不说,其实飞机里有些设备是放在上面的,矮了勾不到。
我们的飞机在黑暗里蠢蠢欲动了15分钟,外面是数以千计的地灯,闪着莹光,努力制造着恐怖的气氛。广播说了第三遍我们的飞机即将起飞时,它终于有了些反映。
加速的感觉很让人振奋,撕裂空气的呼啸声回荡在整个机舱里,大家都屏气凝神,感受从地面到天空的过渡。跑道的颠簸飞快的消失,随即是令人窒息的失重感,坐过过山车的人都知道,一瞬间,飘飘然,没有了重量也没有了脚踏实地的那种沉稳与安全感,所以我们称之为刺激,因为习惯了陆地的生物是体会不到的。可是人体的构造又是如此的精细,以至于每一次上升每一次下落都能通过身体来感知,专业的说是前庭器的作用,三个半规管加椭圆囊球囊,即能感知各个方向加速度的变化---但愿没有记错,其实自己已经好久没碰过书了。透过机翼的空隙,看见橘红的灯火渐渐离我而去,拼凑成一个城市的网络,在夜色中燃成一片朦胧的温暖。目送着那片温暖渐行渐远,这才知道什么叫天上人间。
身边坐着一对父女,父亲精瘦,看起来很疲倦的样子,女儿大约是初中,很可爱。等飞机平稳了,他们各自掏出一本杂志津津有味的看起来。半小时后,激动人心的一刻终于来临---飞机餐,大家都伸着脖子,痴痴的遥望,估计饿的不行了。有鱼肉和牛肉套餐两种,考虑肉价上涨自己已经好久没有吃肉了,于是满怀期待的点了牛肉,打开一看,差点吐血---不要以为几颗贡丸就可以打上肉类标签。幸运的是味道还好,打消了我投诉的热情。边上的小女孩到是兴高采烈的看电视---猫和老鼠---笑得很单纯无邪。
机舱里很安静,外面是比夜色更浅,更温柔的浮云,淡灰色,绵长舒缓,高速的飞机看起来也像是徐徐前进,挣不脱那样软弱无骨的怀抱。云彩少些的地方便可看见星星,璀璨夺目,在地上你看不到这么多星星,被污染的空气掩盖了,身在云霄,你才能看到真正的繁星,近在咫尺,一粒粒,清澈明亮,衬托出苍穹的深沉广袤,悠远博大。月亮出来的时候,我还以为头上的顶灯开了,黄澄澄,在与我视线平行的地方,一轮圆月,娴静安详,表面的明暗对比大致勾勒出山脉平原或是盆地。她就一直这样依在我的窗边,有种视觉上的温暖。
眯了会儿眼,醒来,才发现飞机即将降落,广播里又响起空中姐姐亲切的声音。相比杭州,桂林一定是个不太富裕的地方,灯火懒散,不是阑珊。飞机一路跌跌撞撞的迂回下降,远没有上升来的霸气,还在留念空中的豪迈英姿。只听一声轰响,应该是放下了轮子,然后便是熟悉的颠簸---我们落地了。
后记:其实自己很怕飞机掉下来,因为报道了太多掉下来的例子,于是一路不敢睡觉,时刻准备着掉下来前能打很多电话。后来回来时我点了鱼肉套菜,惊喜的发现了几片真实的鱼肉,然后庆幸还好开始点了丸子,要不就没有惊喜只有失望了。
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出游
2007-07-30 00:38:36
明天去桂林了,四日双飞,桂林-漓江-阳朔,貌似是个好地方
仰天长笑,旅途愉快
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今天我们离开了,也许是永远
2007-07-10 00:52:56
说是早上拿毕业证书,但糜烂的生活已经让我无法习惯清晨的阳光。转身醒来就是10点半,还不忘安慰自己,今天还是早起的。
被催促着吞下一碗粥,然后启程,向遥远的母校进军。烈日下,感觉自己像个英勇就义的斗士。本以为车子会很空闲,上课时间,如我这般顶着蒸笼的角色,除去逃课的,应该不多,但上车还是需要奋力一搏。空调出风口,仿佛奄奄一息的病人,呼呼的喘不了几口气,就沉寂了,搞得我需要不断的变换阵地,寻觅一方清凉沃土。
一路上的风景是如此的熟悉,闻着空气,我就知道行驶到了哪个站头。两年转瞬即逝,在车轮的咕咕声中,在车厢的颠簸之中,我们来了,我们又走了。一眨眼的时间,悲伤,欢笑,叹息,激跃,失望,希望,我们曾经还以为的永远,顷刻间灰飞烟灭。
校园伸出她亲切的臂,给回乡的学子一个深情的拥抱,可惜,我们不再年轻。成长带来的是成熟,还有失却年华的委婉惆怅。看着迎面那一张张稚气未脱的脸,第一次觉得自己的苍老。混匿其中,竟然夹杂了怕被人识破的惊恐。我始终戴着太阳镜,知道自己的眼神里有太多的东西,生怕满溢出来,破坏了这片和缓的肃静。
学生都忙着考试,走进复印店,伙计换了一个,很年轻的小伙子,却已经老道的给学生做缩印(就是很多内容缩小尺寸,其实是方便学生作弊的伎俩)。哑然失笑,很多东西是代代相传,经久不衰的,并且随着科技进步,日趋走向成熟,走向大众。当年自己很少作弊,自恃甚高,看不起这种伎俩,现在想来主要是对缩印技术知之甚少的缘故。现在的复印店是生意最好的时节,我默默地排着队,仿佛穿过时空遥望着当年,遥望每一个淌着汗水,通宵苦读,喂养蚊子的夏天。
毕业证书,学位证书,毕业照,户口转移———四证在手,别无他求。去迟了,也没碰见同学,班长和团支书真是辛苦,彼此寒暄了几句。我觉得自己很傻,苯嘴笨舌,一到这种时刻就不知道说什么好,于是责怪变态的天气,晒坏了原本就不怎么灵光的脑子。摇晃着进去,摇晃着出来。毕业证书很气派,面积是学位证书的两倍,红艳艳,油光光的,让人想起香辣小龙虾,而学位证书好比是一盘缩水的炒青菜。我喜欢把几个金字掩住,这样远远看去像是荣誉证书什么的,很有威慑力。想起学校还欠我几个证书皮,但人到离别时,凡事也看得比较开,不就是个皮嘛,再好也好不过里面那张敲着大红图章的纸。毕业照比想象中的小,清一色学士服,衬托着笑脸分外儒雅。学士服的好处一是均码,二是能挖掘出人的翩翩风采,我想若是我爸穿了,也一样像个大学教授。看到自己鼓鼓的腮帮子,顿觉胖了呢,不知道硕士服是什么样子,有机会定要穿穿。
回去的路上,脚有些痛,是许久不走路的缘故。自嘲,如果在上班是绝对不会发生这种情况的,一天好几台手术都能坚持住,区区几步何足挂齿。车上遇到小煤,一如既往地健谈,亲切好似老朋友,其实我们认识也就1年,还是断断续续的接触,但他天生就是一个亲切的人。他还没有找好工作,现在正准备考试。考试对我来说似乎是很遥远的事了,自从那场决定命运的试考了后,我就不把后面的卷子称为考试卷。不知不觉自己落后了一步,看着小煤谈未来,忽然发现自己的未来其实很模糊,已经从一个交集中分离出来,踏上另一条完全不同的道路,或许终点是一样的,但崎岖的姿态,让人难以承受,害怕自己担负不起。
坐了一小时车,聊了一小时,我到站了,一声再见,也许是再也见不到。回头看看,努力记住那张脸,以及所有曾经在那段岁月里出现的脸,我要回家了。
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钥匙和锁
2007-07-08 00:40:00
Jane,会计,却无法整理自己的感情
Sherry,医生,却医治不了自己的心病
Cry,设计师,却不能设计自己的蓝图
一把钥匙开一把锁,但并不是每一把钥匙都愿意开那一把锁
逃避的是自己,锁还在心里,钥匙还在手里
关起来,封尘,至少可以换来心中的安宁
仿佛时间越过,空间剥离
忘记的是钥匙,留下的是锁
所以会有解不开的心结,密密缠绕。
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注册满2年
2007-07-07 01:09:53
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A Dream
2007-07-06 01:34:31
早上做了一个梦,梦见小草,具体什么记不清了,感觉是小草同志,瘦瘦的高挑身材,面目模糊,貌似一把榔头。醒来确认了一下,9点半,果然是早上。然后开始美滋滋的怀念起小草同志,真是个好孩子,可惜要回老家,不然定要#¥%&@!
情到深处,突然头皮发麻,一个典型的震动模式。抬眼看了下,小草同志的短信,激动地双手颤抖,呼吸急促,面色绯红,血压飙升,连连惊叹自己的超能力居然如此灵验,着实陶醉了一把。那条短信倒是平淡无奇,是个换号码的群发,毫无人情味可言,拨弄了几下,决定告诉草同志早上梦到他,这一奇闻。后来他回道:怎么这么肉麻,不过我爱听..... 看不出那小子平时一本正经,还有这样的嗜好,跌破眼睛!
有时还是很怀念以前上班的日子,虽然很忙但很充实,每天都有做不完的事,都有看不完的帅哥,冬暖夏凉,偶尔还能白吃白喝,不知道以后会面对怎么样的生活,不过应该更加精彩。
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Have a nice day
2007-07-04 02:31:23
中午醒来看到sb. 的短信,说本人还是很有名的,和他共事的丫头竟然知道有我这号人的存在。怀疑自己还没醒,翻了个身,又醒,证明没看错。再看下去,一阵开心,小子还是很有良心的,于是大发慈悲,放弃一顿食堂饭。想来自己本性纯良,最多会要一碗有单位特色的片儿川,还不如做个人情,给异乡同事留个好印象。于是,喜滋滋的大睡。
想当年羡慕别人的是我,在那么恶劣的工作环境中,向往伟大前辈的谆谆教诲。现在轮到自己坐在这个位子上,也不过如此,平凡的如同不起眼的沙砾,过着整天养膘的传奇日子。想起那片作文,真是贴切,更想起叶子在离题的情况下还能考的那么高,仿佛看到天使的光环,天生的,毋庸置疑。
很无聊,但不想去上班,但老板理论上不能忽视,但专业知识不能放下,但家属已经开始威逼,应该好好珍惜这个拼死拼活打下来的暑假,也许是最后一个了。
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今天很开心
2007-06-22 00:05:19
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